Termin "mikroskopia" juuret ovat kreikkalaiset. Käännöksessä se tarkoittaa esineiden tutkimista erittäin tarkoilla instrumenteilla. Viime aikoina fluoresenssi ja elektronimikroskopia ovat tulleet yhä suositummiksi.
Resoluutio
Sen alaisena he yleensä ymmärtävät vähimmäisetäisyyden, jolla selvästi erottuvat esineet voidaan sijoittaa. Mikroskooppiseen maailmaan tunkeutumisaste, kyky ottaa huomioon tutkittavan elementin koko riippuu laitteiston resoluutiosta. Suurella suurennuksella objektien rajat voivat sulautua yhteen. Näin ollen on olemassa tiettyjä rajoja, joiden ylittyessä elementtien approksimaatiolla ei ole merkitystä.
Luminesenssimikroskopiamenetelmä: mekanismi
Kun aineen absorboima energia muunnetaan näkyväksi säteilyksi, syntyy hehkua. Sitä kutsutaan luminesenssiksi. Tämä ilmiö johtuu siitä, että jotkut aineet alkavat valon vaikutuksesta lähettää säteitä, joilla on erilainen (yleensä suuri) aallonpituus. Lisäksi jotkut esineet, joilla normaalissa valaistuksessa on tiettyväri, ultraviolettisäteilyn vaikutuksesta muuttaa väriään.
Omat tiedot
Esine, jota ei voi nähdä ultraviolettivalossa, voi säteillä kirkasta kiiltoa, jos sitä käsitellään erityisellä aineella. Siinä elementit hehkuvat eri väreissä pimeässä. Säteilyn voimakkuus on erilainen, mutta yleensä se on pieni. Tässä suhteessa fluoresenssimikroskopia on tehokas pimennetyssä huoneessa. Tämäntyyppistä tutkimusta käytettäessä kohdetta tarkastellaan sen itsensä lähettämässä valossa. Kudosten, solujen kemiallinen koostumus vaikuttaa tutkimuksen laatuun. Fluoresenssimikroskopiaa pidetään jossain määrin histokemiallisena tutkimuksena.
Luokittelu
Fluoresenssimikroskopia voi olla ensisijaista tai toissijaista. Jälkimmäisessä tapauksessa esine käsitellään erityisillä yhdisteillä, jotka antavat hehkua. Ensisijainen fluoresoiva mikroskopia perustuu elementin omaan kykyyn lähettää valoa.
Varusteet
Fluoresenssimikroskopia suoritetaan useilla eri laitteilla. Niiden pääelementti on valaisin. Se on varustettu UV-lampulla. Lisäksi laitteet käyttävät suodattimia. Joissakin laitteissa on melko paljon erilaisia kokoonpanoja. Riippuen siitä, mitä väriä käytetään luminesenssin herättämiseen - ultravioletti tai sininen, sopiva suodatin asetetaan valonlähteen ja tutkittavan kohteen väliin. Koska mikroskooppisen elementin hehku on energeettisesti heikompaa kuin jännittävä valo, se vangitaan vain yhdellä ehdolla. Lähteestä lähtevät ylimääräiset säteet on leikattava pois kelta-vihreällä suodattimella. Se sijaitsee laitteen okulaarissa. Luminesenssin selkein vaikutus on, kun suodatin katkaisee kokonaan valonlähteestä lähtevät säteet.
Mistä näkyvän valon asennus koostuu? Se sisältää kirkkaan valonlähteen ja biologisen mikroskoopin. Laitteen peilin ja lampun väliin laitetaan sinivioletti suodatin. Se voi olla FS-1, UFS-3 ja niin edelleen. Keltainen suodatin asetetaan mikroskoopin okulaariin. Heidän avullaan sinivioletti valo putoaa esineeseen. Se herättää luminesenssia. Mutta tämä valo voi häiritä hehkun näkemistä. Siksi matkalla silmään se leikataan pois keltaisella suodattimella. Valaistus säädetään Koehler-menetelmällä yhtä poikkeusta lukuun ottamatta. Lauhduttimen kalvon on oltava täysin auki. Tutkittaessa on tärkeää käyttää ei-fluoresoivaa immersioöljyä. Sen oman hehkun vähentämiseksi siihen lisätään nitrobentseeniä (2-10 tippaa / 1 g).
Luminesenssimikroskopia: sovelluksia mikrobiologiassa
Tämäntyyppisen tutkimuksen edut ovat:
- Värikuvausmahdollisuus.
- Suurikontrastisia itsestään säteileviä elementtejä mustalla taustalla.
- Tietyn tyyppisten virusten ja mikrobien havaitseminen ja paikantaminen.
- Kyky opiskella läpinäkyvää ja läpinäkymätöntäelävät organismit.
- Elämän prosessien tutkiminen niiden dynamiikassa.
On myös sanottava, että luminesenssimikroskopia myötävaikuttaa hienoimpien histo- ja sytokemian menetelmien, express-diagnostiikan kehittämiseen.