Seleniittiliemi on selektiivisiä ominaisuuksia omaava rikastusaine, joka on suunniteltu eristämään Salmonella-suvun (lat. Salmonella) patogeeniset bakteerit. Se on erittäin tehokasta, jos on tarpeen havaita tämä tietty patogeeni muiden suoliston mikroflooran edustajien joukossa. Väliainetta käytetään sekä kliiniseen diagnostiikkaan että hygieniaan elintarviketestauksessa.
Yleiset ominaisuudet
Seleniittiliemi valmistetaan jauheesta, joka on homogenoitu seos koostumuksen eri komponenteista. Kuivan materiaalin väri voi olla vaaleankeltainen tai kermanvärinen väliainetyypistä riippuen. Jauheessa on vapaasti valuvia ominaisuuksia.
Valmis seleniittiliemi on nestemäinen läpinäkyvä, vaaleankeltainen väliaine. Tämä massa kaadetaan astioihin, joissa kylvetään jatko-inkubointia varten.
Seleniittilientä on kolmea päätyyppiä:
- puhdas väliaine - sopii salmonellan eristämiseen sekä kliinisestä että hygieniamateriaalista;
- jossa on lisätty mannitolia (kaksikomponenttinen liemi) - suunniteltu toimimaan vain kliinisen materiaalin kanssa;
- kysteiini-seleniittielatusaine - voidaan käyttää salmonellan eristämiseen patologisesta potilaan biomateriaalista (ulosteet, virtsa jne.).
Nämä tyypit eroavat hieman koostumuksesta ja toimintaominaisuuksista.
Seleniittiliemen päätehtävänä on edistää salmonellan kertymistä ja estää sen mukana tulevan mikroflooran kasvua. Tämä mahdollistaa patogeenin havaitsemisen materiaalissa, mutta myös sen siirtämisen myöhemmin agarille. Väliaineen on kehittänyt Leifler, joka löysi ensimmäisenä seleniitin selektiivisen vaikutuksen salmonellaa vastaan.
Koostumus
Seleniittiliemi sisältää:
- kaseiinihydrolysaatti;
- laktoosi;
- natriumfosfaatti;
- natriumhydroseleniitti.
Seleniitti-kysteiiniväliaine sisältää näiden komponenttien lisäksi L-kysteiiniä ja natriumvetyfosfaattia. Mannitoliliemen koostumus eroaa siinä, että se sisältää kaseiinihydrolysaatin sijaan eläinkudoksen peptistä sulatusta. Tällaisessa ympäristössä ei ole laktoosia, mutta mannitolia on. Jälkimmäinen toimii fermentoituvana substraattina ja tarjoaa liemen puskurointiominaisuudet.
Kaikki jauheen komponentit natriumhydroseleniittiä lukuun ottamatta kutsutaan ehdollisesti osaksi A ja selektiivistä ainetta osaksi B.
Toimintaperiaate ja ympäristön ominaisuudet
Selenite-liemi toimii tallennusvälineenävalikoivalla toiminnalla. Selektiivinen vaikutus johtuu seleniitin toksisuudesta, joka estää useimpien mikro-organismien kasvua. Samaan aikaan Salmonella-suvun bakteerit pystyvät palauttamaan tämän yhdisteen, mikä eliminoi myrkyllisen vaikutuksen omiin soluihinsa. Reaktion seurauksena muodostuu kuitenkin alkali, joka vähentää seleniitin haitallista vaikutusta siihen liittyvän mikroflooran kasvuun, ja siksi pH on tarpeen stabiloida. Tämän toiminnon suorittavat bakteerit, jotka fermentoivat laktoosia muodostaen happoa. Väliaineen puskurointi tapahtuu fosfaatilla.
Kaksikomponenttisessa liemessä mannitoli stabiloi pH:n. Kysteiiniväliaine parantaa selektiivistä vaikutusta salmonellaa vastaan. Tällainen liemi on tehokas tarttuvan taustan hallinnassa potilailla, joilla on ei-akuutti sairausvaihe tai toipilaan.
Referenssikantojen kasvuominaisuuksien ilmeneminen alustassa voidaan havaita 12-24 tunnin kuluttua inkubaation alkamisesta. Tässä tapauksessa salmonella muodostaa värittömiä pesäkkeitä.
Ruoanlaittoominaisuudet
Alusta valmistetaan kahdessa vaiheessa. Ensin valmistetaan liuos selektiivisellä komponentilla nopeudella 4 grammaa natriumseleniittiä litrassa tislattua vettä. Lisää sitten 19 grammaa pääjauhetta (osa A). Liuos sekoitetaan perusteellisesti ja kuumennetaan, kunnes hiukkaset ovat täysin liuenneet, minkä jälkeen se kaadetaan steriileihin koeputkiin.
Ruoanlaiton yhteydessä on tärkeää noudattaalämpötilajärjestelmä, koska väliaine on epävakaa ylikuumenemiselta. Liemen sterilointi voidaan suorittaa vain vesihauteessa tai käyttää höyrysuihkua. Väliaineen autoklavointi on ehdottomasti kielletty.
