Nykyajan lääketieteessä on erityisiä diagnostisia menetelmiä, jotka mahdollistavat ihmisten sairauksien etiologian selvittämisen patogeenin määritelmän, immuunivastetta stimuloivien geneettisesti vieraiden aineiden, nukleiinihappojen sekä allergisten ja immuunimuutosten perusteella jotka johtuvat hänen teoistaan. Nykyään RIA:ta käytetään laaj alti immunologiassa ja virologiassa, toisin sanoen radioimmunologisessa määrityksessä, jonka tavoitteet, komponentit, kurssi, jonka kirjanpitoa tarkastellaan, tarkastellaan tässä artikkelissa. Tämä määritys pystyy havaitsemaan antigeenejä niiden vuorovaikutuksen seurauksena vasta-aineiden kanssa.
Määritelmä
RIA on nesteiden biologisesti aktiivisten aineiden diagnosointimenetelmä, joka perustuu antigeenien reaktioon vasta-aineiden kanssa käytettäessä radionuklidileimattuja analogisia aineita, joilla on erityiset sitoutumisjärjestelmät. Heidän vuorovaikutuksensa jälkeenmuodostuu immuunikompleksi, joka erotetaan ja sen radioaktiivisuutta tutkitaan. Tiedetään, että radioimmunomääritys suoritetaan käyttämällä tavallisia reagenssisarjoja.
Jokainen reagenssi pystyy määrittämään yhden tietyn aineen pitoisuuden. Ihmisestä otettu biologinen neste sekoitetaan reagenssin kanssa, inkubaatioajan jälkeen erotetaan vapaat ja sitoutuneet radioaktiiviset aineet, suoritetaan radiometria ja lasketaan tulokset. Jodin isotooppia käytetään aineiden merkitsemiseen. Se merkitään ja lisätään tietty määrä.
Hakemus
Radioimmuunianalyysillä on laaja sovellus lääketieteessä ja mikrobiologiassa. Sitä käytetään sydän- ja verisuonisairauksien, endokriinisten ja muiden kehon järjestelmien sairauksien diagnosointiin. RIA-tutkimuksia käytetään usein myös hedelmättömyyden syyn, sikiön kehityksen patologian tunnistamiseen. Onkologiassa tämä analyysi suoritetaan kasvainten merkkiaineiden määrittämiseksi, jotta voidaan seurata hoidon tehokkuutta. Immunologiassa RIA:ta käytetään tutkimaan immunoglobuliinien, entsyymien, proteiinien ja niin edelleen esiintymistä veressä. Nykyään tämän analyysin avulla voit havaita erilaisten hormonien pitoisuudet gramman miljoonasosaan asti. Näin ollen radioimmuuniverianalyysiä käytetään laaj alti kardiologiassa, onkologiassa, endokrinologiassa, gynekologiassa ja virologiassa.
RIA-menetelmät
On tapana tehdä ero useiden analyysimenetelmien välillä luonteesta riippuenreaktiot:
- Ei-kilpailevalle menetelmälle on tunnusomaista sellaiset reaktiokomponentit kuin standardi- ja havaittavissa olevat antigeenit, puskuriliuos, isotoopilla leimatut vasta-aineet, tietyt sorbenttiin sitoutuvat vasta-aineet. Testattaviin vasta-aineisiin lisätään antigeeni. Inkuboinnin jälkeen ilmaantuu antigeeni-vasta-ainekomplekseja, sorbentti pestään, lisätään leimattuja vasta-aineita, jotka sitoutuvat kompleksissa olevaan antigeeniin. Radioaktiivisuus riippuu testattavan antigeenin pitoisuudesta.
- Kilpailevaa radioimmunomääritystä ohjaa antigeenikilpailu. Täällä on sellaisia reaktion komponentteja kuin kontrolli- ja määritetyt antigeenit, puskuriliuos, tietyt sorbenttiin sitoutuvat vasta-aineet sekä isotooppileimattu antigeeni. Diagnoosi alkaa tutkittavan antigeenin lisäämisellä. Sorbentille muodostuu antigeeni-vasta-ainekompleksi. Sitten sorbentti pestään ja leimattu antigeeni injektoidaan. Näin tehdessään se sitoutuu vasta-aineeseen. Laskureiden avulla mitataan reaktio ja radioaktiivisuuden määrä. Se on käänteisessä suhteessa näytteessä olevan antigeenin määrään.
- Epäsuora menetelmä on yleisin. Tässä tapauksessa reaktiokomponentin radioimmunomäärityksessä on esimerkiksi kontrolli- ja testiseerumia, sorbenttiin sitoutuneita antigeenejä tai vasta-aineita, isotoopeilla leimattuja vasta-aineita, puskuriliuoksia. Diagnosoidut vasta-aineet tai antigeenit reagoivat sorbenttiin sitoutuneiden antigeenien tai vasta-aineiden kanssa. Sitten inkubaatti poistetaan, injektoidaan leimattuja vasta-aineita, jotka sitoutuvatantigeeni-vasta-ainekompleksit.
Analyysimenetelmät
Joten radioimmunomääritys suoritetaan erityisillä reagensseilla. Sarjat ovat vakioita, joten virheet tai rikkomukset eivät ole sallittuja. Diagnostiset tulokset ovat luotettavia. Analyysi suoritetaan aamulla, tätä varten he ottavat laskimoverta henkilöltä. Laboratoriossa seerumi erotetaan verestä, jota käytetään RIA:ssa. Tämä seerumi sekoitetaan reagenssien kanssa. Saatua seosta inkuboidaan tietyssä lämpötilassa termostaatissa.
Vapaat ja sitoutuneet isotoopit erotetaan syntyneestä seoksesta. Tämän jälkeen vastaanotettu materiaali tutkitaan ja tulokset lasketaan. Radioimmunomääritysmekanismilla on useita vaihtoehtoja. Yllä kuvattu tekniikka on nestefaasin RIA, koska kaikki komponentit ovat nestemäisessä tilassa. On olemassa RIA ja kiinteä faasi, joissa vasta-aineet asetetaan kantajaan, joka ei liukene nesteeseen.
Diagnostiikan saatavuus
Tämän diagnostisen menetelmän käyttö lääketieteessä on tulossa yhä suositummaksi joka vuosi. Radioimmunoanalyysistä on viime aikoina tullut standardi diagnostinen menetelmä, jonka lääkäri voi määrätä lopullisen diagnoosin tehdessään. Pitkään tämäntyyppisiä analyysejä tehtiin vain laboratorioissa, nykyään siitä on tullut yleinen tutkimusmenetelmä. Mutta RIA vaatii kalliiden laitteiden käyttöä (gamma-laskurit), ja reagenssisarjoilla on lyhyt käyttöikä. Kaikki tämä on tällaisen analyysin suurin haitta, joka määrittää senkallis hinta.
Lisäksi RIA on hiljattain alkanut syrjäyttää nykyaikaisempia tutkimusmenetelmiä, jotka eivät vaadi vuorovaikutusta isotooppien kanssa. Näitä ovat entsyymi-immunomääritys. Siksi RIA on toivottava monilla klinikoilla. Sitä on käytetty pitkään suurissa kaupungeissa ja diagnoosikeskuksissa, mutta pienten kaupunkien tavallisissa sairaaloissa tätä analyysiä ei käytännössä käytetä sen korkeiden kustannusten vuoksi.
RIAn arvokkuus
Radioimmunomäärityksellä on monia etuja. Se on melko spesifinen ja sillä on korkea herkkyys, mikä mahdollistaa biologisesti aktiivisten aineiden läsnäolon määrittämisen uskomattoman pieninä määrinä. Tämä analyysi suoritetaan hyvin yksinkertaisesti, henkilön on luovutettava vain laskimoverta. Testitulokset ovat 100 % tarkkoja ja valmiita heti seuraavana päivänä. RIA voidaan myös helposti automatisoida. Näin ollen tämän analyysin avulla voit tunnistaa proteiineja, jotka ovat tarttuvien bakteerien jätetuotteita, mikä osoittaa infektion esiintymisen kehossa.
Virusologian diagnoosi
Lupaavin RIA on virologialle, koska sen avulla voit nopeasti tunnistaa viruspatogeenit. Tämä johtuu siitä, että viime vuosina on kasvanut erilaisten infektioiden ilmaantuvuus, jotka leviävät kovaa vauhtia aiheuttaen ihmisten kuolleisuutta. Tämä koskee erityisesti maita, joissa ei ole korkeaasosiaaliseen ja taloudelliseen kehitykseen (Kaukoidän maat), radioimmunomääritys on täällä yksinkertaisesti välttämätön. Mikrobiologia käyttää tätä diagnostista menetelmää myös patogeenisten bakteerien aiheuttamien tartuntatautien havaitsemiseen. Esimerkiksi RIA:ta käytetään laaj alti lavantautien havaitsemiseen. Taudin ensimmäisinä päivinä, ennen hoidon määräämistä, on suoritettava ulosteiden ja oksentelun tutkimus. Diagnostiset tulokset saadaan kuitenkin pitkän ajan kuluttua. Täällä RIA tulee apuun, analyysin avulla voit tunnistaa taudin aiheuttajan lyhyessä ajassa. Henkilö luovuttaa verta, seuraavana päivänä tutkimuksen tulokset ovat valmiita. Tämä analyysi auttaa tekemään tarkan diagnoosin.
Tulokset
Radioimmunomääritys on tällä hetkellä yksi herkimmistä diagnostisista menetelmistä. Sitä käytetään analysoimaan mitä tahansa ainetta, jota vastaan voidaan saada vasta-aineita. Tämä menetelmä mahdollistaa useiden näytteiden valmistamisen pienimmässä tilavuudessa tutkittavaa nestettä sekä tulosten kirjaamisen mahdollisimman lyhyessä ajassa, koska se voidaan täysin automatisoida. Solomon Burson kehitti tämän analyysin 1950-luvulla. Kolmekymmentä vuotta myöhemmin se yleistyi. Toistaiseksi RIA:lle ei ole sataprosenttista vaihtoehtoa, koska analyysillä on korkea herkkyys. RIA:ta käytetään lääketieteen eri aloilla sekä mikrobiologiassa ja virologiassa.
Vihdoin
Menetelmän käyttö virologiassa on erittäin tärkeää nykyään, kuten se antaakyky tutkia infektioiden leviämistä, tehdä tarkka diagnoosi ja määrätä spesifinen hoito. Tämä ongelma on erityisen tärkeä maille, joiden taloudellinen ja sosiaalinen kehitys on alhainen. Tämän analyysin avulla voit myös havaita hormonien ja entsyymien määrän ihmiskehossa. Luotettavien tulosten saamiseksi tutkijan tarvitsee vain luovuttaa verta analyysiä varten. Lääketiede ei pysähdy, radioimmunomäärityksen ohella uusia tutkimusmenetelmiä ilmaantuu, mutta RIA on edelleen yksi lääketieteellisen diagnostiikan johtajista.
