Mikroskooppisen havainnoinnin upotusmenetelmä sisältää erityisen nesteen lisäämisen laitteen linssin ja tutkittavan kohteen väliin. Se lisää kirkkautta ja laajentaa kuvan suurennusaluetta. Siten kohdetta voidaan zoomata merkittävästi ja sen pienimmät elementit voidaan tutkia laitteistoa vaihtamatta. Tämän mukaisesti nestettä kutsutaan upotukseksi. Se voi toimia erilaisina koostumuksina. Suosituin on immersioöljy. Harkitse sen ominaisuuksia tarkemmin.
Yleistä tietoa
Ensimmäinen immersioöljy mikroskopiaan oli setri. Siinä oli kuitenkin yksi merkittävä haittapuoli. Ajan myötä sen ominaisuudet muuttuivat, eikä se mahdollistanut haluttujen tulosten saavuttamista. Ulkoilmassa neste alkoi vähitellen tiivistyä (kovettumiseen asti). Vastaavasti myös taitekerroin muuttui. 1900-luvulla alettiin valmistaa synteettistä immersioöljyä. Tässä nesteessä ei ollut yllä mainittua puutetta.
Immersioöljystandardit
Avainnesteparametrit on asetettu GOST 13739-78:ssa. Standardin mukaan upotusöljyllä on:
- taitekerroin nd=1,515±0,001;
- läpäisevyys spektrialueella 500 - 700 nm kerrospaksuuden ollessa 1 mm - 95 %, 400 - 480 nm - 92 %;
Optimaalinen lämpötila, jossa upotusöljyä voidaan käyttää, on 20 astetta. On myös kansainvälisiä standardeja. ISO 8036/1:n mukaan taitekerroin on 1,518 + 0,0005 ja läpäisykyky 10 mm:n kerroksella spektrialueella 500-760 nm on 95 % ja 400 nm:ssä 60 %.
Nämä parametrit vastaavat ei-fluoresoivaa immersioöljyä. ISO 8036-1/2 -standardi määrittelee nesteen luminesenssiominaisuudet. Läpäisykyky spektrialueella 500 - 700 nm 10 mm:n kerroksessa on 95 %, 365 - 400 nm - 60 %.
Parametrierojen vaikeudet
Yllä olevissa standardeissa havaittava ero voi johtaa tietyn objektiivin suorituskyvyn heikkenemiseen, kun käytetään sopimatonta nestettä. Tulos:
- Kontrasti pienenee pallopoikkeaman vuoksi.
- Tutkimuskohteen kenttä on värillinen.
- Valaistus tutkittavan kohteen tasossa ja sen kuvanmuodostusalueella muuttuu epätasaiseksi.
- Kuvasta tulee epäselvä.
Vuanssit
Optisilla mikroskoopeilla on resoluution ylärajahieman yli 100 kertaa. Tällä suurennustasolla tutkittavan kohteen valaistuksen tulee olla korkealaatuista. Muuten tuloksena oleva kuva on niin tumma, että objektia on mahdoton nähdä. Tosiasia on, että valon taittuminen ja sironta tapahtuu kansilasin ja objektiivin välillä. Upotusöljy edistää sen suurempaa t alteenottoa. Tämän seurauksena kuvasta tulee selkeämpi.
Valon taittumisen ominaisuudet
Miten saat selkeän kuvan? Eri medioissa valon taittuminen tapahtuu eri tavoin. Esimerkiksi säteiden taitekulmat ilmassa ja lasissa ovat erilaisia. Ensimmäisessä tapauksessa indikaattori on 1,0, toisessa - 1,5. Tämä on suurin ongelma.
Öljyn käytön avulla voit pienentää tutkittavan kohteen läpi kulkevien säteiden taitekerrointa. Tosiasia on, että nesteellä on sama parametri kuin lasilla. Tämän seurauksena objektilasin ja linssin väliin muodostuu homogeeninen väliaine, ja suurin osa kohteen läpi kulkevasta valosta pääsee instrumenttiin. Tämä johtaa selkeään kuvaan.
Tekniset kohdat
Yleensä upotuslinssin säiliöissä on kaiverrus öljyllä. Itse elementtiä käytetään, kun tarvitaan 1,0 tai suurempi aukko. Tällaisia "immersio"-linssejä käytetään suoraan nesteeseen upottamiseen. Tässä suhteessa ne on täysin suljettu. Tämä tarjoaa korkean suojan linssejä öljyvaurioilta.
Luokittelu
Öljyjä käytetään käytännössäkaksi viskositeettia: korkea (tyyppi B) ja matala (A). Usein pakkauksesta löydät tietoa taitekertoimesta. Ne tuottavat esimerkiksi immersioöljyä (100 ml), jonka taitekerroin on 1,515. Matalaviskositeettiset nesteet levitetään ilmatilaan ja korkeaviskositeettiset - yhdessä lauhduttimien kanssa.
Käyttöehdot
Jos haluat saada selkeän kuvan tutkittavasta kohteesta, sinun on noudatettava melko yksinkertaisia suosituksia:
- Etsi tutkittava kohde kentän keskellä olevasta liukusäätimestä pienellä lisäyksellä. Tätä varten käytetään vähän suurentavaa linssiä.
- Käännä tornia.
- Aseta objektiivi 100x työasentoon.
- Laita tippa öljyä liukulasille ja toinen tippa linssiin.
- Säädä työskentelyetäisyyttä hienotarkennuksella, kunnes kohde on selvästi näkyvissä.
Työskentelyssä on oltava varovainen. On tärkeää estää ilmaa pääsemästä peitinlasin ja objektiivin väliin.
Immersioöljy "Minimed"
Nestettä käytetään työskenneltäessä minkä tahansa tyyppisten laitteiden akromaattisten ja apokromaattisten linssien kanssa, paitsi luminoivien linssien kanssa. Tätä upotusöljyä käyttäneiden asiantuntijoiden mukaan sillä on useita hyödyllisiä ominaisuuksia. Neste parantaa merkittävästi kohteen näkyvyyttä minimoiden häikäisyä, valohäviöitä ja optisia poikkeamia. Öljyn käyttö laajentaa huomattavasti varusteiden valikoimaa.
Siivousvarusteet
Upistusöljyn kanssa työskentelyn jälkeen laite on saatettava kuntoon. Puhdistus tulee tehdä ennen kuin linssi kuivuu. Puhdasta linssipaperia käytetään öljyjäämien poistamiseen. Valssattua levyä käytetään kaikkien lasipintojen puhdistamiseen. Linssipaperi on kostutettava linssiliuoksella ja jäljelle jäänyt öljy on poistettava.
Historiallista taustaa
Ensimmäinen tutkija, joka selitti upotusmekanismin, oli Robert Hooke. Vuonna 1678 julkaistiin hänen kirjansa Microscopium, jossa annettiin kaikki selitykset. Vuonna 1812 immersiota ehdotettiin keinona korjata linssin aberraatioita. Idean kirjoittaja oli David Buster. Vuoden 1840 tienoilla valmistettiin ensimmäiset upotettavat linssit. Heidän luojansa oli D. B. Amici. Aluksi tutkijat käyttivät anisöljyjä upotusnesteenä. Taitekerroin oli lähellä lasin taitekerrointa.
