Menetelmät saostumisreaktion asettamiseen

Sisällysluettelo:

Menetelmät saostumisreaktion asettamiseen
Menetelmät saostumisreaktion asettamiseen
Anonim

Tämä artikkeli on omistettu sadereaktion ilmiölle. Tässä tarkastellaan tämän ilmiön muotoilun piirteitä, diffuusioilmiötä, yleisiä ominaisuuksia, roolia ihmisen elämässä ja paljon muuta.

Johdatus ilmiöön

saostumisreaktion yleinen ominaisuus
saostumisreaktion yleinen ominaisuus

Saostuminen on serologisen tyyppinen ilmiö, jonka aikana liukoiset antigeenit ovat vuorovaikutuksessa vasta-aineiden kanssa ja sen seurauksena havaitaan saostumista - sakka.

Saostumisreaktion yleinen ominaisuus on eräänlainen antigeenin ja vasta-aineen koordinoitu vaikutus. Tämäntyyppiset vuorovaikutukset mahdollistavat tuntemattomien antigeenien esiintymisen määrittämisen testiaineessa lisäämällä tunnettuja vasta-aineita ja antigeenejä. Saostusprosessi ilman suolojen läsnäoloa etenee huonommin, ja paras optimi on välillä 7,0-7,4 pH.

Reaktion ainesosat

saostusreaktiokomponentit
saostusreaktiokomponentit

Saostumisreaktion komponenttien joukossa on kolme pääelementtiä:

  1. Antigeeni, jolla on molekyyliluonne. Se on hienossa tilassa, toisin sanoen seliukeneva. Tällaista antigeeniä kutsutaan myös saostusaineeksi, joka on lysaatti tai kudosuute jne. Saostusaineella on tyypillinen ero agglutinogeeniin verrattuna, mikä piilee niiden hiukkasten koosta, joista se koostuu. Agglutinogeenilla on luontainen solukoko, ja saostumat ovat oikeassa suhteessa molekyylin kokoon. Antigeeniliuokselle on ominaista läpinäkyvyys.
  2. Ihmisen veriseerumista sekä immuunijärjestelmän diagnostisesta seerumista löydetty vasta-aine, joka sisältää tutkittuja vasta-aineita.
  3. Elektrolyytit ovat natriumkloridiliuoksia, jotka ovat isotonisia.

Saostetuotanto

Saostusreaktion aikaansaaminen on mahdotonta ilman saostusainetta, joka saadaan jauhamalla materiaaleja ja uuttamalla niistä proteiiniantigeenejä. Uuttaminen tapahtuu keittämällä tai muilla menetelmillä.

Lysaatit sekä kudos- ja elinuutteet, veriseerumi, erityyppiset mikrobiliemiviljelmiin perustuvat suodokset sekä mikro-organismien ja autolysaattiaineiden suolauutteet ovat silmiinpistäviä esimerkki saostusaineista.

Säätö sateessa

Mietitään nyt saostusreaktion asettamismenetelmää.

Suoritetaan rengassaostusreaktio, joka tapahtuu erityisesti valmistetuissa koeputkissa. Seerumi johdetaan astioiden onteloon kaatamalla se seinän yli pipetin nokan avulla. Seuraavaksi sopiva määrä saostetta kerrostetaan varovasti päälle ja sitten putki nostetaan pystysuoraan asentoon vaakasuorasta. Saostumisreaktion asettaminen ja huomioon ottaminen on erittäin huolellinen toimenpide. Tulos kirjataan valkoisen renkaan ilmestymisen jälkeen antigeenin ja vasta-aineen väliselle rajalle. Jos reaktion reagoivat elementit vastaavat toisiaan, ne sitoutuvat, mutta tämä tulee havaittavaksi pitkän vuorovaikutuksen jälkeen

Saostusreaktio suoritetaan myös petrimaljassa tai lasilla objektilasi, johon agargeeli siirretään, levittämällä sitä pienenä kerroksena. Sen jälkeen kun se kovettuu geelissä, siitä leikataan pieni määrä kuoppia, joihin antigeenit ja vasta-aineet asetetaan. On kaksi tapaa suorittaa tämä toimenpide: radiaalinen immunodiffuusio ja kaksoisimmunodiffuusio.

saostusreaktiota ei käytetä
saostusreaktiota ei käytetä

Yleistä tietoa

Saostustyön mekaniikka on samanlainen kuin agglutinaatiolaitteen. Immuunityyppisen seerumin vaikutuksesta reaktioon jo tullut antigeeni vähentää dispergoitumisastettaan. Tärkeä ehto on sekä seerumin että antigeenin läpinäkyvyys.

Voit parantaa reaktion rekisteröintiä, jos asetat antigeenejä vasta-aineiden päälle. Tämän seurauksena voidaan havaita saostumien ilmaantumista renkaan muodossa. Tätä ilmiötä kutsutaan rengassaostukseksi ja se suoritetaan erityisissä putkissa, joiden halkaisija on 2,5 - 3,5 mm. Yksi yleisimmistä esimerkeistä saostumisreaktiosta on pernaruttodiagnoosi.

Saostuksen avulla on mahdollista määrittää kurkkumätäviljelmän toksisuustaso agarissa.

Tarkasteltavana olevan reaktion aikanatapahtuu antigeenisten kompleksien ja vasta-aineiden saostumista. Saostuminen on immunologinen ilmiö, jonka avulla voit määrittää vasta-aineiden määrän sairaan tai rokotetun henkilön ja eläinten veren seerumissa.

Titrausseuraus

menetelmät saostumisreaktion aikaansaamiseksi
menetelmät saostumisreaktion aikaansaamiseksi

On tärkeää tietää, että edellä mainitulla menetelmällä titraamalla saatuja tietoja ei voida ilmaista määrällisesti. Vasta-aineiden sisältämän määrän kvantitatiivisen arvioinnin luomiseksi ja analysoimiseksi M. Heidelberger ja E. Kabat kehittivät erityisen reaktiotekniikan, joka perustuu ekvivalenssivyöhykkeen etsimiseen ja tunnistamiseen. Antigeenien ikäluvun sekoittaminen vakiotilavuuteen antiseerumia johtaa alun perin muodostuneen sakan lisääntymiseen, ja sitten se taas vähenee, koska kyky liuottaa antigeenikompleksit lisääntyy. Määrittämällä vasta-aineiden määrän kussakin putkessa olevissa supernatanteissa, voit havaita, että tietyltä määrältä vasta-aineita sisältäviä maljoja puuttuu nestettä. Täällä muihin koeputkiin verrattuna muodostuu suurin sakka. Tästä johtuen ja antigeenisen proteiinisaostuman vähentäminen proteiinien kokonaisarvosta on mahdollista saada tarkasteltavana olevan spesifisen seerumin tilavuuteen sisältyvien vasta-aineiden tarkka arvo. Lisäksi sakan proteiinimolekyylien määrä määritetään typen määrällä tai kolorimetrisillä menetelmillä.

Arvojen arviointi

saostumisreaktion asettaminen ja huomioon ottaminen
saostumisreaktion asettaminen ja huomioon ottaminen

Diagnostisessa metodologiassa saostumisarvojen arvioinnissa tulee ottaa huomioon mahdollisuus, että immuuniseerumissa on vasta-ainetta, jolla ei ole saostumisominaisuutta, mistä seuraa, että sakka itse ei ehkä ole muodostuu reagoituaan antigeenien kanssa. Tällaisten molekyylien luettelo sisältää epätäydellisiä vasta-aineita ja joitakin lajeja gamma-A-globuliinien ryhmästä.

Laboratorio-olosuhteissa tapahtuvaa saostumisreaktiota voidaan soveltaa erilaisissa modifikaatioissa. Esimerkiksi lämpösaostusreaktiota käytetään havaitsemaan botulismi-, pernarutto jne. bakteeriantigeenit, jotka eivät käy läpi lämpödenaturaatiota. Toisin kuin rengassaostuksessa, tämän tyyppisessä reaktiossa käytetään kyseessä olevan materiaalin suodoksia keitetyssä tilassa.

Saostusreaktion analyysi monimutkaisessa seoksessa ei mahdollista seoksen yksittäisten alkuaineiden ominaisuuksien karakterisointia. Tällaisissa tapauksissa henkilö turvautuu agar-saostusmenetelmään ja käyttää myös immunoelektrofereesiä.

Hajasateet

saostumisreaktiot
saostumisreaktiot

Tällä tutkimusalueella on käsite diffuusi saostusreaktio (RPD). Se perustuu vasta-aineiden ja liukoisten antigeenien kykyyn diffundoitua geelissä. Diffuusio on lämpöliikkeen aiheuttamaa tietyn aineen molekyylin kykyä tunkeutua toisen molekyyleihin.

Geeli on dispergoitu tyyppinen järjestelmä, jossa nestefaasi jakautuu tasaisesti kiinteään faasiin. Useimmiten tällaiseen reaktioon käytetään agargeeliä.

Kun parametrit on annettu,olosuhteissa, joissa molekyylit voivat diffundoitua suhteessa toisiinsa, niiden kohtaamiseen liittyy antigeeni + vasta-ainekompleksin muodostuminen. Tällainen kasvain pystyy diffundoitumaan, koska se on itse geelissä, ja se saostuu muodostaen nauhan, joka voidaan havaita paljaalla silmällä. Jos antigeeni ja vasta-aine ovat homologisia, vyöhykettä ei muodostu.

Diffuusion olosuhteiden luominen agarkerroksessa ollessaan edellyttää komponenttien kaatamista, mutta kuoppien kokonaismäärä ja niiden suhteellinen sijainti määritetään päättää vaadittavan tehtävän tyyppi. RPD antaa henkilölle mahdollisuuden havaita ja tunnistaa tuntemattomia eristettyjä viruksia testaamalla tunnetuilla vasta-aineseerumeilla.

Hakemus

diffuusi saostumisreaktio
diffuusi saostumisreaktio

Saostumista ei käytetä laaj alti vain sairauksien diagnosoinnissa, vaan sitä käytetään myös oikeuslääketieteellisessä tutkimuksessa. On vaikea kuvitella analyysiä, jossa on mahdollista määrittää rikosaseesta, joka ei käytä saostumisreaktiota, löydetty veren laji, elimen osa tai kudos. Tämän prosessin aikana käytetään saostuvia seerumeita, jotka saadaan immunisoimalla erilaisia eläimiä ja lintuja. On tärkeää, että seerumin tiitteritaso on vähintään 1:10 000 ja sillä on myös oltava riittävä spesifisyys. Havaitusta veripisteestä tai sen kuoresta tehdään ote fyysistä varten. ratkaisu, joka altistuu edelleensaostava seerumi. Tämän reaktion mukaan on mahdollista määrittää sekä ihmisten että eläinten kudos- ja elinproteiinityypit. Sameiden uutteiden saaminen pakottaa turvautumaan agar-saostukseen.

Johtopäätökset

Analysoimalla luettua tietoa voimme päätellä, että saostumisreaktiot ovat erittäin tärkeitä henkilölle, koska ne mahdollistavat erilaisten antigeenien diagnosoinnin vasta-aineiden avulla, tätä ilmiötä käytetään laaj alti myös oikeuslääketieteellisessä tutkimuksessa ja sen avulla voit tunnistaa verta, kudosta tai elintä suhteessa tiettyyn kohteeseen. On olemassa useita saostustyyppejä ja -menetelmiä, joita käytetään ratkaistavan ongelman esiin tulevien tarpeiden mukaisesti.

Suositeltava: